摘要: 多樣品組織研磨儀對水稻研磨葉片研磨實(shí)驗主要目的是滿(mǎn)足分子標記輔助育種中基因型鑒定 、基因克隆 、測序的需要,本研究借用棉簽等具吸附功能的材料代替移液器,依次直接在2種DNA提取液中操作,建立了一種簡(jiǎn)單 、快速 、環(huán)保的水稻葉片DNA提取方法.結果表明,提取溶液通過(guò)PCR擴增,滿(mǎn)足基因擴增對模板的要求;

同時(shí),對其進(jìn)行了靈敏度測試,稀釋107倍仍然能夠擴增出目標片段;最后通過(guò)PCR、克隆載體連接等分子生物學(xué)手段,驗證此方法也滿(mǎn)足測序的需要.本方法能夠在90s內完成植物葉片DNA的提取,解決了目前植物基因組DNA提取方法需要離心機等昂貴特殊設備 、提取步驟繁鎖 、提取過(guò)程中刺激味大 、提取時(shí)間長(cháng)等問(wèn)題,有利于大規模開(kāi)展分子標記輔助育種中材料基因型的鑒定,具有簡(jiǎn)單 、快速 、廉價(jià) 、環(huán)保等優(yōu)點(diǎn).

實(shí)驗目的：擬測試全自動(dòng)樣品快速研磨儀對水稻葉片研磨效果

1.測試對象：上海凈信多樣品組織研磨儀，型號為JXFSTPRP-24L

2.工作原理：樣品（水稻葉片）放入離心管中，放入研磨球，通過(guò)研磨儀的高速上下振蕩帶動(dòng)研磨珠進(jìn)行粉碎樣品。

3.實(shí)驗器材：上海凈信組織研磨儀主機，水稻葉片，不銹鋼研磨珠兩顆，提取試劑

實(shí)驗步驟：

一、首先根據研磨要求將組織研磨儀的研磨頻率及研磨時(shí)間進(jìn)行設置

二、把水稻葉片剪成小段放入凈信離心管中，加入氧化鋯珠和相應提取試劑

三、最后把離心管放入機器適配器中，啟動(dòng)設備進(jìn)行研磨，完成樣品粉碎

實(shí)驗效果：

研磨前后效果圖

注：多樣品組織研磨儀針對葉片的研磨時(shí)，盡可能加提取試劑，讓研磨過(guò)程中有液體的情況下使研磨效果會(huì )更加充分。